高效液相色谱仪
2020-01-16 09:55     (点击: )
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仪器名称

高效液相色谱仪

型号

1260infinity

设备状态

在用

价格

366000.00

所属院系

动物科技学院

放置地点

生工B504

管理教师及院办电话

郭良兴86176315

售后公司及电话

郑州崇源科贸有限公司 67351981

仪器介绍及操作流程

主要功能:氨基酸、维生素成分检测

操作规程

一、开机

1.1打开电脑

1.2打开液相色谱各个模块的电源

1.3双击桌面“LC1260”,进入联机界面

1.4排气:

1.4.1手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)

1.4.2右键单击“Pump”图标区域,选择“Method”选项,进入泵编辑画面,设流速:5ml/min,点击确定

1.4.3右键单击“Pump” 图标区域,点击“Control”选项,选中“ON”,点击确定,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止(一般为5分钟),切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止;

1.4.4右键单击“Pump” 图标,点击“Method”选项,设流速:0ml/min,手动旋紧冲洗阀;

1.4.5右键单击“Pump”图标,点击“Method”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速:1.0ml/min;(不一定是1

1.4.6同理右键单击“Column Comp”“DAD”图标,点击“Method”选项,按照方法的要求设置温度,波长,点击控制选项,“ON”打开柱温箱和检测器。

二、编辑方法

2.1  点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法;

2.2  选中除“Data Analysis ”外的三项,进入下一选项卡,选择“Als”(自动进样),点击“OK”,进入下一选项;

2.3  选择“Method”菜单下“Method Information”选项,在“Method Comments”中加入方法的信息(如:This is for test!),选择“OK”,进入下一选项;

2.4  泵参数设定:右键单击“Pump”图标,点击“Method…”选项,设置“Flow”:如1.0ml/min“Stop Time”:如10 min(该停止时间仅为做一个样品需要的时间),按照要求选择合适比例的流动相配比,选择“OK”,进入下一选项;

2.5  自动进样器参数设定:右键单击“Sampler”图标,点击“Method”选项,选择“Injection volume”,输入进样体积,选择“OK”,进入下一选项;

2.6  柱温箱参数设定:右键单击“Column Comp”,点击“Method”选项,设置“Left”温度(可设置温度范围:低于室温10℃-80℃),一般“Left”“Right”温度一致,选择“Combined”绑定即可,“Stop Time”选择“As Pump /Injector”,选择“OK”,进入下一选项;

2.7  UV检测器参数设定: 右击“DAD” ,点击“Method…”选项,下方的空白处输入所需的检测波长(可根据需要选择多个波长,最多可选8个波长);“Stop Time”选择“As Pump /Injector”“Spectrum” ——“Store”选项下,根据需要选择 “None”“All(全波长扫描)等选项,选择“OK”,进入下一选项;

2.8  编辑方法完毕,从“Method”菜单中,选中“Save Method As”,输入一方法名,选择“OK”,保存方法成功。

三、单针进样

3.1  “Run Control”菜单中,选择“Sample Information”选项,输入“Operator Name”;在“Data File”中选择“Path”“Prefix/Counter(文件命名)设置“Prefix(一般设置为年月日)“Counter”;输入“Location(样品位置)“Sample Name”,选择“OK”,进入下一选项;

3.2  基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项,开始进样。

四、序列进样

4.1  选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项,在“Confiqure Table”中选择需要选项,一般为“Vial(样品瓶)”“Sample Name(样品名称)”“Method Name(方法名称)”“Inj/Vial(进样次数)“Sample Type(样品类型)“Datafile(文件名)“Inj Volume(进样体积)

4.2  点击“Inset”生成一行,设置上述参数,选中该行,点击“Copy”“Paste”复制后修改相应参数,即生成序列表,选择“OK”,进入下一选项;

4.3  点击“Sequence”菜单下“ Sequence Parameters”选项,选择序列数据的“Path”(序列会自动生成以序列名称-时间为名称的文件夹保存数据),数据建议选择 “Prefix/Counter”保存;在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”,根据需要选择“PUMPALL OFF(序列结束后关闭泵)”” “LAMPALL OFF(序列结束后关闭紫外灯)”” “STANDBY(序列结束后关闭紫外灯和泵),选择“OK”,进入下一选项;(注:若“Path”中默认保存于C盘,则可点击“View”,选择“Preferences”,根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径)

4.4  “Sequence”菜单,选中“Save Sequence Template As”,输入一序列名,选择“OK”,即可;

4.5  基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项,开始序列进样。(注:若中途停止运行,则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息,若选择Abort,则所有图谱信息都丢失)

五、数据分析(脱机状态使用)

5.1  双击“LC1260Offline图标进入的脱机画面

5.2  “View”菜单中,点击“Data Analysis”进入数据分析画面

5.3  “File”菜单选择“Load Signal”,选中所需的数据文件名,点击“OK”,则数据被调出。

5.4  谱图优化:从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”。从范围中选择“Full”“Use Ranges” 选择所需“Time Range”“Response Range”,选择“OK”;从“Integration”中选择“Integration Events”,调整“Area Reject”“Height Reject”删除杂峰;点击“Set Integration”图标,可选择性消除不需要的积分,若想消除该操作,则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可,点击左边“√”图标,将积分参数存入方法并退出“Integration Events”。(注:“Set Integration”图标为)

六、标准曲线绘制

6.1  选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”,选择“Automatic Setup”“Level(即标曲中对应的点,第一个点即为1“Defanlt Amount(标准品对应点的浓度),选择“OK”

6.2  通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数,若为外标法,在“ISTD”项下选“NO”,若为内标法则选“Yes”“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一;若想更改标准曲线中的对应点;

6.3  选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项,选择“Average”则表示取当前点与标曲中对应点的平均值替代标曲中原对应点,若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点;

(注:修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法:选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修改“Amount Units”,设置浓度单位;选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修改“Default CalibrationCurve” 选择合适的曲线类型-Type,是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-Weight,通常选Equal

6.4  调出样品谱图,点击需要计算浓度的色谱峰,选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”“Detail”,点击“OK”后选择打印预览图标,在报告中即可体现计算结果。

七、图谱重叠设置

7.1  选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项,选择任意需要重叠的图谱;

7.2  “Signal”选项下,选择“3D Signal Overlay”图标(紧邻图谱上方左起第四个图标),在弹出的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度;若想移除重叠谱图,点击第六个图标。

八、信噪比等参数计算

8.1  选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项,设置时间范围(超过1min);

8.2  选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”“Perfomance+Noise”,点击“OK”后,即可预览信噪比参数;

8.3  选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”“Extended Perfomance”,点击“OK”后,即可预览对称性、拖尾因子等所有参数。

九、程序运行时检测出峰情况

选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可。

十、打印报告

10.1 “Report”菜单中选择“Report Mode”,选择“Use Classic Reporting”

10.2 “Report”菜单中选择打印报告,则报告结果将被打印。

十一、关机

11.1 冲洗色谱柱和系统后,退出化学工作站及其它窗口,关闭计算机;关闭Agilent 1260各模块电源开关。

仪器图片(插入图片)

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