仪器介绍:
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。
操作规程:
1、 配置所需流动相,并真空抽滤,超声脱气15-20分钟;
2、 流动相超声脱气时,打开输液泵、检测器电源开关;
3、 打开电脑,待检测器自检完成后(检测器开机后自检2-3分钟)运行工作站软件,如果仪器没有正常联机,需要点击仪器键盘的local/remote键,帮助仪器联机,正常联机后仪器屏幕右上角应该显示remote,并且工作站软件上也能够正常显示压力和信号值;
4、 换上流动相,逆时针打开输液泵的排空阀1/4到1/2圈,点击仪器控制界面输液泵的purge键以5ml/min的流量冲洗3-5分钟,用以置换掉输液管路里面的残余流动相。排空完毕,先按输液泵的stop停止运行,再关闭排空阀;
5、 在仪器控制界面输液泵的参数中输入所需等度流量,点击应用进行确认,点击run键运行输液泵;
6、 在仪器控制界面检测器参数中输入所需波长,点set键确认,设定积分时间为0.1s,点set键;
7、 点击仪器控制界面的左上角“文件”,选择“谱图处理”,点击打开谱图采集处理界面,然后切换到仪器控制界面点击检测器的start键开始采集基线,平衡色谱系统20-30分钟左右;
8、 准备对照品,并对样品进行前处理;
9、 系统稳定后,基线走直,点击仪器控制界面检测器的stop键停止谱图采集,在谱图采集处理界面选择不保存谱图。
10、 将六通阀切换到load位置,用微量注射器吸取80ul左右标样或者样品,赶去气泡,将样品匀速推入定量环,然后快速扳动六通阀到inject位置,仪器将自动进行谱图采集;
11、 一个样品运行完毕后,点击仪器控制界面检测器的stop键停止谱图采集,在谱图采集处理界面重新命名并保存谱图(建议按照日期+样品编号的方式);
12、 重复执行第10、11步,将所有标样、样品分析完毕;
13、 进入关机步骤,首先关闭检测器电源,然后进行系统清洗;
14、 如果本次使用的流动相含盐,首先将流动相替换为95:5=水:甲醇,利用第4、5步方法冲洗系统30分钟,最后换成纯甲醇,再次冲洗系统30分钟,使系统保存在纯甲醇系统中。关闭输液泵电源、电脑电源;
15、 用5mL左右纯甲醇冲洗六通阀。
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