仪器介绍:
ChemiDoc XRS+ 化学发光成像系统是以高分辨率和高灵敏度的 CCD 为成像检测技术为基础,模块化设计,支持多种检测方法,包括荧光,比色,光密度,化学发光和化学荧光等,满足绝大多数样品检测。该系统是由Image Lab软件控制,使系统性能得到优化,从而使成像达到快速、自动化和分析的统一。
该系满足各种样品成像,从大型手灌聚丙烯酰胺胶到小型琼脂糖预制胶和各种转印膜的成像。该系统通常和PCR,蛋白纯化系统和电泳系统配合使用,适用于限制性酶解,核酸扩增,基因指纹,RFLP,蛋白纯度和特征分析。
操作流程:
1、打开成像仪器背面电源开关和CCD电源(化学发光实验时,CCD需提前预冷15-20min);关机时,关闭电源开关,并注意切断CCD电源。
2、双击桌面上ImageLab软件图标,打开软件。
一、使用Image Lab 软件进行化学发光影像采集流程
1、点击软件左上角 ,新建实验协议→印迹→Chemi(化学发光,灵敏度高)或Chemi Hi Resolution(分辨率高)。
注意:滤光片选择杆拨动到No Filter的位置
2、在成像区域对话框中的下拉式选单中选择合适的样品大小或手动输入图像区域(非必需)
3、设置图像曝光时间
软件可手动设置曝光时间或使用信号累积模式,信号累积模式可设置第一个图像和最后一个图像的曝光时间,图像总数。
4、将样品放置在紫外透射平台的中心位置,点击窗口左侧的 ,观察显示器中样品的实时影像,打开照胶系统的门并移动样品直到位于视野的中心区域。可利用照相机的变焦滑板调节影像采集区域的大小。
5、 点击 按钮来采集影像。
6、原始图像保存:
(1) 不使用信号累积模式,直接点击保存按钮,将图像保存成scn格式的原始文件。
(2) 信号累积模式下,藉由移动鼠标到影像上,就能实时地判定强度值,可再利用位于左边的图像转换窗口中的调节光标来改变影像的显现。若确定调整到符合您要求的影像时,点击 按钮舍弃其他不适合的影像来完成采集影像的程序。也可在SAM(信号累积模式)采集影像的过程中或之后来保存需要的影像,直接点选右键单点缩图窗口内的影像即可进行存盘保留下来。
在决定采集影像的数量前,需要先确定增加SAM影像参数是否会影响背景值的变化。当采集的影像次数提高时,可能会造成接近背景值的讯号难以辨识,若需要针对较弱的信号进行采集,仍然建议选择适当的曝光时间来进行影像采集。
7、 TIFF等格式文件的导出:
文件→导出→导出以便发布(设置分辨率)→点击导出→保存成想要的图像格式。
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