仪器介绍:
全自动不锈钢发酵罐普遍适用于科研院所以及企业的微生物实验室,是精密发酵试验的理想工具。可以适用于微生物发酵培养的培养基配方的筛选,发酵工艺参数的优化以及生产工艺与菌种的验证。特别是粗醪培养基尤能适应。
操作流程:
1.设备使用之前,应先检查电源是否正常,空压机、微机控制系统、循环水系统是否能正常工作。
2. 检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。
3. 开动空压机,用0.15Mpa压力,检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门的密封性能是否良好。
4. 对温度仪、调速电机,电容涡街流量计应根据使用说明书进行检查、校正。
5. 上岗人员对上述各项必须能熟练操作。
空消
在投料前,气路、料路、种子罐、发酵罐、碱罐、消泡罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态。
1. 空气管路的空消
(1) 空气管路上有三级预过滤器,冷干机和除菌过滤器。预过滤器和冷干机不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向预过滤器的阀门关闭,使蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。
(2) 除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压,因此,蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa,不得超过0.15MPa。
(3) 空消过程中,除菌过滤器下端的排气阀应微微开启,排除冷凝水。
(4) 空消时间应持续40分钟左右,当设备初次使用或长期不用后启动时,最好采用间歇空消,即第一次空消后,隔3~5小时再空消一次,以便消除芽孢。
(5) 经空消后的过滤器,应通气吹干,约20~30分钟,然后将气路阀门关闭。
2. 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消
(1) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消。
(2) 空消时,应将罐上的接种口,排气阀,及料路阀门微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,同时保持罐压为0.13~0.15Mpa。
(3) 空消时间为30~40分钟,特殊情况下,可采用间歇空消。
(4) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消前,应将夹套内的水放掉。
(5) 空消结束后,应将罐内冷凝水排掉,并将排空阀门打开,防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。
(6) 空消时,溶氧、PH电极取出,可以延长其使用寿命。
实消
实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程,种子罐、碱罐、消泡罐和发酵罐实消的操作过程相同。
1. 空消结束后,应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水。
2. 培养基在进罐之前,应先糊化,一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65%左右,泡沫少的培养基可达75~80%),考虑到冷凝水和接种量因素,加水量为罐体全容积的50%左右,加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关,需在实践中摸索。
3. 先开启机械搅拌装置,使罐内物料均匀混合,转速50~100rpm。
4. 打开夹套蒸汽阀、排汽阀,对罐内培养基预热,当罐内温度升到90℃时,关闭夹套进汽阀,打开罐内所有进汽阀,通入蒸汽。当罐温上升到105℃时,缓缓打开排汽阀,将罐顶冷空气排掉,持续五分钟后,关闭排汽阀。
5. 当罐压升至0.12Mpa,温度升到121—123℃时,控制蒸汽阀门开度,保持罐压不变,30分钟后停止供汽。
6. 打开冷却水的进排阀门,在夹套内通水冷却,当罐内压力降至0.05Mpa时,微微开启排气阀和进气阀,进行通气搅拌,加速冷却速度,并保持罐压为0.05Mpa,直到罐温降至接种温度。
种子罐接种、培养
1. 本设备采用火焰封口接种,接种前应事先准备好酒精棉花、钳子、镊子和接种环。
2. 菌种装入三角烧瓶内,接种量根据工艺要求确定。
3. 将酒精棉花围在接种口周围点燃,用钳子或铁棒拧开接种口,此时应向罐内通气,使接种口有空气排出。
4. 将三角瓶的菌种在火环中间倒入罐内。
5. 将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。
6. 接种后即可通气培养,罐压保持在0.05Mpa。
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